蓝耳病抗体检测原理及结果解读
来源：猪相关 2021-06-25 17:00:34| 查看：
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大部分感染了蓝耳病病毒（PRRS）的猪在7-14天左右的范围内产生抗体。少部分猪（少于5%）会延迟到21天之前产生抗体。
这些最初产生的抗体指向的是蓝耳病毒的N蛋白，N蛋白是蓝耳病毒抗原性最强的蛋白。但是N蛋白抗体跟保护性没有直接关系，因为它们没有病毒中和能力。市场上大部分的商业ELISA试剂盒使用N蛋白进行诊断，一方面是因为可以实现早期诊断。另一方面是N蛋白是I型和II型蓝耳病毒的共享表位，使基于N蛋白的ELISA可以通用于两种病毒的检测。有些商业试剂盒增加了其他抗原如GP5，以增加检测谱。当前所有的ELISA试剂盒都无法分辨野毒和疫苗毒。
大部分的商业蓝耳病ELISA使用的是间接法ELISA，也有少量使用其他方法。间接ELISA是将病毒抗原包被在微孔板上，然后加入血清进行检测。检测结果的展示是通过加入连接了酶的猪IGg抗体。加入了合适的反应基液之后，如果发生了抗体抗原反应，酶就会存在于微孔内，那么反应基液就会在酶的作用下变色。在这种类型的ELISA中，变色基液的颜色深度与血清中的抗体含量成正比。因此可以通过这种方法来实现半滴定。定量的表达方式一般是通过血清中的颜色浓度对比标准品的颜色浓度。
这里用到的就是所谓的S/P值，具体血清的S/P值会因为所用试剂盒的不同而不同，因此试剂盒相互之间不能直接比较。
通常的提法是野毒感染的S/P值会比疫苗的S/P值高。这种说法一般情况下是成立的，但有些情况下，有的野毒导致的S/P值比较低但是一样可以致病。换句话说，不能简单地通过S/P值来预测毒力。
在一个蓝耳阴性且未做过疫苗免疫的猪群，使用ELISA方法进行检测时，检测效果非常理想。这种情况下S/P值通常很高，从阴性（健康）到阳性（感染）的变化非常明显。相反，如果经过了免疫，血清转化就会很不明显。实际上，有相当一部分的经过多次免疫的母猪，在进行了加强免疫之后，也不会提高S/P值。有多种原因会导致这种情况。
一种解释是免疫反应饱和，也就是说到了一个点之后，无论再打多少的加强针抗体都不会再继续增加。另外一个原因是随着反应的推进，免疫优势抗原会发生改变。最后还有一个不能排除的原因是，经过多次免疫之后，猪会对N蛋白无反应（但并不表示失去免疫保护）。
总之，基于N蛋白ELISA的检测结果一般只能用来说明猪是否已经与蓝耳病毒（疫苗毒或野毒）发生了接触，但不能用来预测毒株的毒力以及猪是否获得了免疫力。
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