伪狂犬病是由伪狂犬病毒（PRV）引起的多种动物共患的以发热，奇痒（猪除外）及脑脊髓炎为主要特征的一种重要传染病。猪是伪狂犬病毒的自然宿主，可造成种猪繁殖障碍、仔猪神经症状和早期大量死亡，商品猪呼吸道疾病、生长迟滞，常给猪场造成巨大的经济损失。近年来的流调资料表明，我国猪群gE抗体阳性率仍处于较高水平，野毒依然广泛存在。因此，对该病的防控不能有丝毫松懈。准确地监测诊断是科学防控该病的前提和基础。根据疾病的临诊症状、病理变化，结合流行病学，可做出初步诊断，确诊必须进行实验室检测。
1 猪伪狂犬病临床诊断
猪日龄不同，感染毒株的毒力不同，其临床表现的严重程度也不同。
1.1种猪主要表现为繁殖障碍
成年种猪主要表现为繁殖障碍，同时还伴有体温升高（40～41°C），妊娠母猪多见呼吸困难、食欲减退、便秘、水肿和结膜炎等，但很少发生死亡。妊娠母猪流产，产死胎、弱仔、木乃伊胎，其中以产死胎为主。无论是头胎母猪还是经产母猪都会发病，妊娠早﹑中﹑晚期均可发生，而且没有严格的季节性。感染PRV的母猪群，还可长期不发情，屡配不孕，假孕等，有时返情率可达60%以上。种公猪则出现睾丸炎、附睾炎、鞘膜炎等致使睾丸、附睾萎缩硬化，失去种用价值。
伪狂犬造成母猪流产
1.2产房仔猪大量死亡，有神经症状和拉稀
以窝为单位，大的症状严重些；鼻塞，打喷嚏；出现口吐白沫和四肢划水、角弓反张的神经症状；部分仔猪出现腹泻；15日龄以内的猪发病死亡率可达100%。
产房仔猪口吐白沫和神经症状
1.3保育猪顽固性腹泻、神经症状、呕吐
体温升高，41℃左右，精神沉郁、采食量快速下降，饮水量也显著下降，咳嗽明显，甚至发生“过料”性腹泻；有些表现为神经症状、呕吐；发病率20％～40％，死亡率10％～20％，甚至更高。
保育猪神经症状、腹泻
1.4中大猪以高热、呼吸道症状为主
体温升高、咳嗽，临床表现容易与猪蓝耳病和猪流感混淆。变异毒株可导致部分猪出现神经症状；部分猪继发感染传染性胸膜肺炎等病，死亡率可达10～30%，严重时甚至高达50%。
中大猪体温升高、扎堆，后躯瘫痪，继发传染性胸膜肺炎
临床生产中，很多猪场首先育肥猪或后备猪发病，表现为高热和呼吸道症状，继而病毒传到保育猪，部分猪出现神经症状，如不及时干预，则可造成母猪大批流产、死产，产房小猪出现神经症状和大批死亡。
2 病理剖解
变异毒株毒力明显增加，猪群感染常有典型的猪伪狂犬病变：扁桃体水肿、化脓、出血、溃疡甚至形成伪膜；肝脏、脾脏形成非常典型的黄白色坏死点或白色坏死结节病变；肺脏弥漫性点状出血，肠道出血，肾出血，脑出血、水肿等特别典型的病理变化也可见。
脾脏、肝脏灰白色坏死结节（卢兆彩等）
肾脏、肾上腺出血（卢兆彩等）
肺脏斑点样出血、黄白色坏死
胃粘膜充血、出血、溃疡
扁桃体出血、坏死、溃疡
脑膜充血、实质出血
3 实验室监测、诊断
猪伪狂犬病原检测可采用动物接种、细胞分离鉴定、分子生物学检测等；抗体检测可采用中和抗体、ELISA、免疫金标等，最常用的是ELISA方法，可检测伪狂犬gE/gI抗体和gB抗体。
3.1样品采集
病原学和分子生物学检测可采集病猪脑、肝脏、脾脏、肺脏、淋巴结、肾脏、扁桃体等组织以及鼻咽分泌物。
血清抗体的检测采集前腔静脉、耳静脉或尾根静脉血。采样前要根据监测的目的，确定采样方案。如果全面掌握猪群伪狂犬感染和免疫抗体水平，采样时建议将猪群按照生产流程分为多个小群体（如将种猪分为种公猪、后备母猪、怀孕中期、怀孕后期、哺乳期母猪群），将仔猪或肉猪群按日龄阶段进行分群（如将猪群分为30天、60天、90天、120天、150天等小群体或按照周龄进行分群），每个阶段（每个小的群体）应采集5-10份样品，种公猪应全部采样监测。
3.2动物接种试验
将采集的组织样品匀浆后，加生理盐水制成10%悬浮液，每毫升添加青、链霉素各1000单位，离心取上清液备用。取健康家兔2只，于后腿皮下注射上清液2毫升，家兔于24小时后表现出精神沉郁，发热，呼吸加快，脉搏加快，家兔开始舔接种部位，以后逐渐变成用力撕咬接种点，严重者可出现角弓反张，在地上翻滚，仔细观察患部可发现有出血性皮炎、局部脱毛、皮肤破损出血，家兔表现局部奇痒症状，出现症状4-6小时后病兔衰竭，倒卧于一侧，痉挛，呼吸困难而亡。病料也可接种小鼠，采用脑内或鼻腔接种，有痒的症状，可持续12小时，但小鼠不如家兔敏感。
3.3细胞分离培养
病毒的分离是诊断伪狂犬病的最可靠方法。将处理后的病料上清滤过除菌，直接接种敏感细胞，如猪肾传代细胞(PK-15和IBRS-2)、仓鼠肾传代细胞(BHK-21)或鸡胚成纤维细胞(CEF)，在接种后24～72 h内可出现典型的细胞病变，若初次接种无细胞病变，可盲传3代。分离到病毒后再用标准阳性血清做中和试验以确诊本病，或结合分子生物学的方法鉴定。
3.4分子生物学诊断
可采集组织样品或鼻咽拭子用PCR或荧光PCR方法检测gE基因。需要注意的是伪狂犬病毒核酸DNA的GC含量很高，必须选适合高GC含量扩增的mix或buffer进行扩增。普通PCR方法可参照《GB/T 18641-2018伪狂犬病诊断方法》执行，gD基因检测引物为通用型引物，扩增产物217bp，gE基因检测能区分gE基因缺失株和野毒株，扩增片段为368bp。《GB/T 35911-2018伪狂犬病毒荧光PCR检测方法》推荐了伪狂犬病病毒核酸的多重荧光PCR方法，gH基因探针用FAM标记，野毒和疫苗毒株均能检出，而gE基因探针用HEX标记，只有伪狂犬野毒株能检出。
3.5血清抗体检测
ELISA具有特异性强、敏感度高、操作简便、重复性好等特点，也是最简便的方法之一，得到许多国家的认可，已有成熟的商品化伪狂犬gB-ELISA和gE-ELISA抗体检测试剂盒。目前，猪场使用的绝大部分是gE基因缺失疫苗，ELISA检测可以区分免疫抗体和野毒抗体，在猪场净化过程中发挥重要的作用。gB抗体是免疫抗体，需要注意伪狂犬抗体阳性标准和保护标准是有区别的，保护标准通常高于阳性标准，这个要根据试剂商的建议和临床检测大数据确定；gE抗体是野毒感染抗体，仔猪、保育猪和育肥前期的猪gE抗体有可能是母源抗体，伪狂犬gE母源抗体持续时间为90日龄左右，120日龄以后gE抗体阳性代表存在伪狂犬的感染。
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