PRRSV灭活疫苗对仔猪或生长育肥猪的免疫效力

来源：郭海兵曹海涛等硕腾猪业 2022-07-04 15:36:58| 查看：次

　　书接上回：PRRS灭活疫苗免疫效力评价、PRRS灭活疫苗对母猪的免疫效力，本文分享PRRS灭活疫苗对仔猪或生长育肥猪的免疫效力。

　　2.2 PRRSV灭活疫苗对仔猪或生长育肥猪的免疫效力

　　Zuckermann F A.等（2007）使用某商品化的弱毒疫苗（PRRSV MLV）和某灭活疫苗分别免疫5月龄猪，首次接种疫苗时间为D0天，免疫28天后（D28）用105.0TCID50 PRRSV(Lelystad)攻毒，D42天安乐死试验猪，结束试验，具体分组和各项工作见表2-2。

　　表2-2实验分组设计

*表示剖检时采集的样本

　　结果显示：1）攻毒4天（D4）以后至试验结束时（D42），试验1组没有测到病毒血症，而试验2组和试验3组（对照组）均有明显的病毒血症，且两组间差异不显著（图2-5）；2）试验结束时，PCR检测试验猪肺和扁桃体，试验1组、试验2组和试验3组肺部PRRSV阳性率分别20%、90%和100%，试验1组中阳性猪的肺部病毒载量也比试验2、3组显著低（P<0.05，图2-6）；试验1组、试验2组和试验3组扁桃体PRRSV阳性率分别是60%、100%和100%，试验1组中阳性猪的扁桃体病毒载量也比试验2、3组显著低（图2-6）；3）试验1组免疫和攻毒后至试验结束血清中都没有测到中和抗体，试验2组免疫后产生了微弱的中和抗体，但是攻毒10天（D38）后中和抗体明显升高，显著高于试验1组和3组（P<0.05），试验3组只是在试验结束时（D42）测到微弱的中和抗体（图2-7）。上述试验结果表明该灭活疫苗预防PRRSV(Lelystad)感染效果较差，优先选择MLV疫苗。

图2-5各组血清病毒载量几何均值

图2-6各组肺脏和扁桃体病毒载量

图2-7各组血清中和抗体滴度（SVN）

　　Nilubol D.等（2004）通过试验验证商品化的灭活疫苗(PRRomiSe®,Intervet,USA)在处理之前PRRSV感染猪的排毒影响，具体分组：试验1组不攻毒的对照组，试验2组灭活疫苗对照组，试验3组攻毒对照组，试验4组攻毒+14、28天灭活疫苗免疫两次，攻毒的组都是在0天鼻内接种1mL PRRSV VR-2385 105.4TCID50/mL（表2-3）。结果显示：病毒血症滴度和持续时间试验4组和试验3组无差异；所有攻毒猪只到21天都可以分离到病毒；尸体剖检时，试验3组扁桃体8/18可以分离到病毒，试验4组扁桃体6/15可以分离到病毒，但是PCR检测PRRSV RNA，试验3组和试验4组所有猪的扁桃体都是阳性。中和抗体结果：试验1组和试验2组整个试验阶段都没有中和抗体；试验3组和试验4组在攻毒后28天中和抗体达到较高水平，但是差异不显著，在42天差异显著（P<0.05）（图2-8）。该试验表明仔猪感染PRRSV之后免疫该灭活疫苗，虽然可以诱导更好的体液免疫水平，但是没有缩短病毒血症和组织排毒时间，对于防控PRRSV感染没有起到相应的作用。

　　表2-3实验分组设计

图2-8各组对PRRSV VR-2385中和抗体平均值

　　蔡学辉等（2009）分别采用PRRSV CH-1R致弱疫苗株和HP-PRRSV灭活疫苗免疫40-45日龄仔猪，免疫接种后4周，用HP-PRRSV HuN-4强毒攻毒，攻毒后21天剖检，取主要器官作病理组织学观察和病毒抗原定位。结果显示临床症状：空白组猪生长发育良好；攻毒对照组外形消瘦，在攻毒后第2天即出现体温升高并持续至死亡，耳部发绀；HP-PRRSV灭活疫苗免疫组在攻毒后也出现体温升高、生长迟缓现象，在攻毒后14天和17天均有死亡；CH-1R弱毒苗免疫组攻毒后无明显变化。剖检观察：空白对照组无明显变化；攻毒对照组猪腹股沟淋巴结和颌下淋巴结出血肿大，肺脏有灶状出血，肝脏有坏死灶，肾脏淤血；HP-PRRSV灭活苗免疫组颌下淋巴结肿大有出血点，肠系膜淋巴结和腹股沟淋巴结肿大出血，扁桃体轻度潮红，肝脏有条状出血，肾表面有出血，脾萎缩；CH-1R弱毒苗免疫组腹股沟淋巴结肿大，肺轻微膨胀不全。组织抗原结果：HP-PRRSV灭活疫苗免疫攻毒后导致的病理变化和病毒抗原分布程度均明显高于CH-1R弱毒疫苗免疫组（表2-4）。该研究结果表明CH-1R弱毒疫苗对HuN-4强毒免疫保护效果好于HP-PRRSV灭活疫苗。

　　表2-4 PRRSV抗原免疫组化检测结果

　　李福泉等（2021）对由ISA201VG和ISA70VG佐剂分别制备的2种NADC30-PRRSV SY株灭活疫苗的免疫效果进行比较研究。选用35日龄PRRSV抗体和抗原均为阴性的健康仔猪15头，随机分为3组：试验1组（ISA201VG免疫组）、试验2组（ISA70VG免疫组）和对照组（未免疫攻毒组）。试验组首免107.0TCID50/头，间隔21天后以相同剂量进行二次免疫，采用ELISA法检测PRRSV血清抗体，结果显示：免疫后第35天，试验2组的5头猪PRRSV抗体转阳率达100%，试验1组的5头猪PRRSV抗体转阳率达40%（图2-9）。二免后14天采用NADC30-PRRSV SY株攻击试验猪，攻毒剂量为1×105.0TCID50/mL，检测各组猪体温变化，结果显示：试验2组从攻毒后第8天起体温超过40℃，持续6天；试验1组的5头猪只有1头体温超过40℃；对照组5头猪攻毒后第11-13天体温升至40℃持续3天（图2-10）。各组猪增重检测显示：试验2组与对照组相比较，体重呈现负增长且体重减少均在5%以上，而试验1组与对照组相比较，体重呈现正增长且增长均在7%以上（图2-11）。对PRRSV感染后2个试验组肺组织病理观察均可见肺脏呈局限性间质性肺炎和淤血，并伴有血栓、部分肺泡隔增宽，支气管周围有淋巴细胞浸润伴有间质性肺炎，但试验2组比试验1组组织病变更加严重（表2-5）。本试验结果表明ISA201VG佐剂效果更好，同时证实类NADC30-PRRSV（SY株）制备的灭活疫苗对于同源毒株的攻毒保护较差，不宜制备灭活疫苗免疫。虽然该试验重点在讨论不同佐剂的效果，但是也显示了类NADC30-PRRSV（SY株）不宜制备灭活疫苗。

图2-9不同佐剂配制的PRRSV灭活疫苗接种猪后的抗体变化

图2-10类NADC30-PRRSV/SY株攻毒后各组猪的体温变化

图2-11类NADC30-PRRSV/SY株攻毒后各组猪的体重变化

　　表2-5两种佐剂制备的PRRSV灭活疫苗免疫猪攻击NADC30-PRRSV/SY株后的组织病理变化

　　Chaosi Li等（2022）试验研究了某商品化的弱毒活疫苗和两个不同灭活疫苗联合免疫仔猪的保护效力。具体试验分组（表2-6），4周龄免疫弱毒活疫苗，7周龄灭活疫苗加强免疫，10周龄104.5TCID50/mL NADC30-like攻毒（D0），12周龄（D15）解剖，采样检测。抗体检测结果：无论N蛋白抗体还是GP蛋白抗体，与单针免疫弱毒活疫苗（试验1组）相比，灭活疫苗的加强免疫（试验2组、试验3组）并不能提升抗体水平，没有激发记忆性体液免疫反应（图2-12）。发热情况：与阳性对照组相比，疫苗免疫组的发热天数和比例减少，而且差异极显著（P<0.001），但是疫苗免疫组之间统计学无显著差异（图2-13A）。临床评分：攻毒后第2天，除了阴性对照组，所有猪只都表现出不食、少食等临床症状，疫苗免疫组临床症状均结束于攻毒后第11天，但是阳性对照组试验结束时仍有咳嗽等临床症状（图2-13B）。肺脏大体病变和病毒载量：与阳性对照组相比，疫苗免疫组肺脏组织病毒滴度明显降低，而且差异极显著（P<0.001），但是单针免疫弱毒活疫苗和加强免疫灭活疫苗组在肺脏大体病变和病毒滴度上统计学没有显著差异（图2-14 A,B）。平均日增重：与阳性对照组相比，疫苗免疫组有极大改善，差异极显著；但是灭活疫苗加强免疫组和单针免疫弱毒活疫苗组统计学没有显著差异（图2-15）。该试验结果表明：弱毒活疫苗和灭活苗联合免疫程序中，灭活疫苗加强免疫没有激活记忆性体液免疫反应，没有降低肺组织中病毒载量，没有减轻肺脏大体病变，没有提升增重，所以对于本研究中NADC30-like攻毒不能提供更好的保护，同时表明：该PRRSV弱毒活疫苗对异源毒株只能提供部分保护，想通过用灭活苗加强免疫来提高效力，达不到目的；在灭活苗免疫之前，先用弱毒活苗做首免，结果差异不显著。

　　表2-6实验分组及方案

图2-12抗体检测结果

图2-13各组体温和临床症状评分

图2-14各组肺脏眼观病变和病毒滴度

图2-15各组平均日增重

　　PRRSV毒株的快速变异导致毒株多样性，并且部分猪场存在多个谱系毒株共存的情况，增加了防控PRRS的难度，猪场为了稳定蓝耳病，选择使用弱毒疫苗和灭活疫苗联合使用，但是前面试验数据已经证实效果甚微。试验条件下或田间条件下，单纯使用灭活疫苗或者是之前感染过PRRSV的阳性猪群再使用灭活疫苗，对于减少排毒时间和排毒量以及提高生产成绩作用有限。

　　3总结

　　综上所述，PRRSV灭活疫苗一般很难产生或者产生的中和抗体滴度较低，而且刺激产生的细胞因子反应一般也认为是佐剂的作用，属于非特异性免疫反应，大部分试验数据显示在预防PRRSV感染、减少排毒、提高生产成绩方面效果甚微。

　　也有文献报道，先免疫PRRS弱毒疫苗或者猪只感染过PRRSV之后，再免疫灭活疫苗，会激发更好的体液免疫和细胞免疫，这方面有正面的报道也有反面的报道，总体对防控PRRSV感染和减少排毒作用有限。

　　中国动物疫病预防控制中心制定的《2022年国家动物疫病免疫技术指南》指出，要科学合理选择PRRS灭活疫苗和活疫苗，在PRRS发病场或阳性不稳定场，可选择使用和本场流行毒株匹配的弱毒活疫苗，当前商品化弱毒活疫苗与类NADC30毒株亲缘关系较远，免疫后均无法阻止类NADC30毒株的感染，交叉保护不足，但疫苗免疫能一定程度上降低感染猪的病毒血症滴度，缩短排毒时间。

　　所以，PRRS防控需要综合措施，如生物安全、疫苗免疫、后备母猪隔离驯化和继发细菌疾病防控等，不能完全依赖疫苗免疫。目前很多种猪企业PRRSV净化提上日程，PRRSV灭活疫苗有一定的用武之地，可以在准备净化PPRSV的猪场稳定之后，种猪群免疫使用。

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