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曲向阳:某样品(血液或组织等)PCR检测PRRSV阳性,该如何解读?

来源: 曲博士猪群健康管理 2020-07-19 10:59:02| 查看:

  各位养猪产业链的朋友,你们好!
  
  前几天受湖南农业大学动物医学院邀请,向动物医学院的师生们介绍了《当前养猪产业的机遇与条件及学院产学研结合发展的建议》的主题报告,报告后,走访了湖南农业大学的研究实验室,实验室的装备与研究进展都远超我的预期,学院的余兴龙教授作了很多很具有实践性的研究。产学研之间的交流很重要,期望我的报告能够让更多的毕业生选择加入养猪产业!
  
  昨天一个朋友问了一个关于PRRSV问题:若一份猪的血液或组织样品经PCR检测阳性,应该如何解读?
  
  简单谈谈我的看法。
  
  任何实验室检测报告的解读一定是建立在临床背景调查(临床症状、免疫记录等)与(大体或显微)病理病变的基础之上的。将临床表现与实验室分子生物学检测的结果相互比对、印证,提升检测结果的可靠性。
  
  一、若某样品检测PRRSV阳性,可能如下:
  
  通常出现阳性的结果,好解释些。
  
  1)样品中存在具有传染性的PRRSV病毒(疫苗毒或野毒),需要进行进一步的测序工作。将测序结果与疫苗株、流行野毒株序列进行比对。
  
  2)样品中存在不具有传染性的PRRSV病毒。PCR检测结果阳性,并不代表样品中的病毒是活的,可能并不具备传染性的(比如环境样品中的ASFV病毒,PRRSV病毒等)。
  
  3)因样品受到污染等因素,导致检测结果阳性,但对于猪群而言是假阳性,猪群是阴性的。
  
  以上是ELANCO关于枝原净在育肥猪阶段使用的广告
  
  二、若检测结果阴性,该如何解读呢?
  
  1)样品中的确不存在PRRSV 核酸。
  
  2)样品中的病毒含量过低,PCR体系敏感度不够,检测不到。
  
  3)样品在运输、保存等过程中核酸发生降解,导致了检测不到病毒核酸;
  
  4)因为引物设计不合理或反应体系本身的问题,导致检测结果不可靠。
  
  5)虽然样品中不存在病毒,但猪群中存在。由于采样方案不合理或猪群中PRRSV感染比例较低,导致没有采集到含有蓝耳病毒的样品,结果不能代表猪群的实际感染状态。
  
  对于阴性的结果,若临床上有可疑的临床表现、病理变化等,可以重新采样、送检不同的实验室、利用不同的方法进行检测(不同的引物,或利用ELISA方法辅助)等。临床上,蓝耳检测更容易出现假阴性结果。
  
  综上所述,分子生物学检测体现的是样品中是否存在目标核酸片段。有时候,目标核酸片段存在,因为引物问题、反应体系问题或敏感度问题,导致检测不出来,出现假阴性结果。有时候,样品中不存在目标核酸片段,猪群中存在,采样不合理(方法、数量、猪群选择等)产生了误导。
  
  所以,实验室检测结果,必须与临床结合,与病理结合,进行综合诊断。
  

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