口腔液是研究猪应激的最佳液体样品,其中的皮质醇可以作为评估猪应激的标记物。猪群运输、不同环境、不同饲养条件(如不同饲养密度、不同日粮组成、打耳标、采血等)下,猪口腔液中皮质醇不同。另外,口腔液中 IgA、α-淀粉酶活性、IL-18 、嗜铬粒蛋白 A 和急性期蛋白(APP,包括 C-反应蛋白、血清淀粉样蛋白 A 等)含量增减变化,可以用于猪群应激压力的评估。
四、猪口腔液的采集
因为猪舍环境条件和检测目标等的不同,猪口腔液的采集方法会有一定差异,同时采集方法、器械、地点和时间等会影响口腔液的组成成分。在此推荐一种猪口腔液的采集方法:将直径1.3cm的全棉绳用于保育猪、直径 1.6 cm的绳子用于生长育肥猪和生产公母猪口腔液采集,用于采集育成猪口腔液的工具如图2所示,悬挂处应远离饲槽和猪排便区。棉绳上端固定,下垂高度与猪只的肩关节齐平(图3),任猪咀嚼,30 min 后收取棉绳(图4),刮取和挤压口腔液至自封袋(图5),然后装入EP管或其它容器。一般认为≥ 1 mL为有效采集量。
图2.用于采集育成猪口腔液的工具(Prickett et al., 2008) 图3.育成猪在咀嚼棉绳(Prickett et al., 2008) 图4.棉绳样品的收集(Prickett et al., 2008)
图5.获得的猪口腔液(Prickett et al., 2008)
五、猪口腔液采集注意事项
(1) 口腔液检测并非疫病诊断或检测标准程序,仅用于猪群中循环抗体或病原的检测和评估。
(2) 单独处理样品,一旦发现抗体或病原,方便回溯研究。
(3) 棉绳相较于其它材质绳吸收性最好。
(4) 培养猪群啃咬绳子的习惯,方便后续采集。
(5) 宜在猪群较为活跃的上午采集样品。
(6) 绳子的悬挂高度应与猪肩胛部齐平。
(7) 猪有喜新厌旧的心理,已经使用的绳子不宜再用。
六、猪口腔液在猪疾病诊断方面的应用
在兽医领域,1905年,前苏联最早将马的口腔液用于疾病检测(Blake and Tobin, 1986)。在猪,1976年Corthier首先将猪口腔液用于猪瘟的检测。近十几年来,国内外动物医学界对猪口腔液的研究报道日渐增多和深化,将为猪口腔液在分析、检测等方面的推广应用提供良好的前景。